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    細(xì)胞計數(shù)用臺盼藍染料or AOPI熒光染料?
    發(fā)布時間:2023.08.31 瀏覽數(shù):1357
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    細(xì)胞計數(shù)是細(xì)胞培養(yǎng)過程中的重要步驟,為了解細(xì)胞的濃度、數(shù)量和活率等信息,實驗人員常用臺盼藍染料或AOPI熒光染料對細(xì)胞進行染色-計數(shù)。


    1、臺盼藍染色法

    臺盼藍染色是細(xì)胞計數(shù)中常用的活/死細(xì)胞鑒定染色方法之一。


    原理:正常的活細(xì)胞,胞膜結(jié)構(gòu)完整,能夠排斥臺盼藍,細(xì)胞不被染色;而死細(xì)胞的胞膜不完整,通透性增加,既死細(xì)胞會被染成藍色,利用臺盼藍染料的特性便可區(qū)分活/死細(xì)胞。

    缺點:

    1-臺盼藍對細(xì)胞有毒害作用,會致死有損傷的細(xì)胞,導(dǎo)致細(xì)胞活性檢測結(jié)果有所偏差;

    2-細(xì)胞碎片多、雜質(zhì)多等情況下,無法進行準(zhǔn)確計數(shù)。


    適用細(xì)胞種類:培養(yǎng)系細(xì)胞。


    2、AOPI染色法

    當(dāng)細(xì)胞樣品中的雜質(zhì)過多,明場下無法進行準(zhǔn)確計數(shù)時,我們可以在熒光通道下,用AOPI熒光染料對細(xì)胞進行染色。


    原理:AOPI熒光染料因其只與DNA和RNA結(jié)合的特性——既活細(xì)胞呈現(xiàn)綠色,死細(xì)胞呈現(xiàn)紅色,利用AOPI染色法,可排除雜質(zhì)對目標(biāo)細(xì)胞的干擾,快速區(qū)分活/死細(xì)胞。

    優(yōu)點:可排除紅細(xì)胞、血小板、細(xì)胞碎片等雜質(zhì)對目標(biāo)細(xì)胞的干擾。


    缺點:與臺盼藍試劑相比,成本較高。


    適用細(xì)胞種類:免疫細(xì)胞、原代細(xì)胞、血液細(xì)胞等。

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